|
Zamknij X
|
Fosfor nieorganiczny – oznaczanie w surowicy krwi metodą z chlorkiem cyny (II) (Zgirski A., 1965)
W powyższej metodzie chlorek cyny (II) jest reduktorem molibdenianofosforanu amonowego. Na powtarzalność wyników ogromny wpływ ma przestrzeganie właściwej kwasowości w momencie redukcji. W trakcie oznaczenia wykorzystywany jest kwas siarkowy (VI), którego końcowe stężenie nie może być mniejsze niż 0,5 M. Zwiększenie stężenia kwasu powoduje automatyczne zmniejszenie czułości metody, a mniejsze stężenie wpływa na redukcję nie tylko kompleksu fosforomolibdenowego, lecz również samego molibdenianu (VI). Konsekwencją są znaczne błędy pojawiające się w trakcie oznaczenia,które dyskwalifikują metodę [1].
Odczynniki:
1) Macierzysty roztwór chlorku cyny (II): 40 g SnCl2 ∙ 2 H2O rozpuścić w stężonym roztworze kwasu solnego, wymieszać i uzupełnić próbkę kwasem do objętości 100 ml. Otrzymany roztwór należy przechowywać w ciemnej butelce, w lodówce. Roztwór ten jest bardzo czuły na zanieczyszczenia, przez co też nigdy nie należy pobierać go prosto z butelki.
2) Rozcieńczony roztwór chlorku cyny (II): macierzysty roztwór należy rozcieńczyć 200x za pomocą wody destylowanej.
3) Roztwory wzorcowe (przygotowane w analogiczny sposób jak w metodzie Fiske-Subbarowa) [1].
Wykonanie:
Do 0,5 ml surowicy należy odmierzyć 1 ml 20% roztworu CCl3COOH. Dokładnie wymieszać, odczekać 10 minut, a następnie do próbki dodać 3,5 ml wody. Zawartość probówki ponownie wymieszać, a dalej przesączyć przez sączek [1].
Do probówki skalowanej na 6 ml odmierzyć 1 ml otrzymanego przesączu, a do drugiej probówki 0,5 ml wzorca (0,01 mg P w 1 ml) oraz 0,2 ml roztworu CCl3COOH (próba wzorcowa). Do trzeciej skalowanej probówki należy odmierzyć 0,2 ml roztworu CCl3COOH (próba kontrolna) [1].
Do wszystkich przygotowany probówek dodać po 1 kropli roztworu p-nitrofenolu (tj.: 0,1%), a następnie zobojętnić je roztworem amoniaku (tj.: ok. 3% roztwór NH3) do momentu pojawienia się lekko żółtego zabarwienia. Próbki uzupełnić wodą do objętości 6 ml. Następnie do próbek dodać po 2 ml 2,5 M roztworu kwasu solnego (VI) oraz 1 ml 7,5% roztworu molibdenianu (probówki zakorkować i dokłądnie wymieszać przez kilkakrotne przechylanie). Dodać dość szybko 1 ml rozcieńczonego roztworu chlorku cyny (II) (cynawego) i natychmiast dokładnie wymieszać. Inkubować próbki przez 2 minuty, po czym oznaczyć wartość absorbancji wobec próby kontrolnej. Oznaczenie wykonywać przy λ= 720 nm [1].
Przygotowana próbka kontrolna powinna mieć bardzo słabe zabarwienie- jeżeli zabarwienie jest intensywne, świadczy to o niedokładnym przygotowaniu próbki, niedokładnym przyrządzeniu roztworu kwasu siarkowego lub obecności zanieczyszczeń fosforem w odczynnikach/wodzie [1].
Na podstawie otrzymanych wyników należy wykonać obliczenia:
mg/100 ml = (Aroztworu badanego / A wzorca) ∙ 0,005 ∙ (100/0,1)= (Aroztworu badanego / A wzorca) ∙5
gdzie:
0,005 – ilość mg fosforu w próbce wzorcowej
0,1 – ilość ml surowicy wzięta do wywołania barwy
Lub
mg/100 ml = A roztworu badanego ∙ współczynnik kalibracji
gdzie:
współczynnik= 5/A wzorca [1].
25 maja 2018 roku zacznie obowiązywać Rozporządzenie Parlamentu Europejskiego i Rady (UE) 2016/679 z dnia 27 kwietnia 2016 r (RODO). Potrzebujemy Twojej zgody na przetwarzanie Twoich danych osobowych przechowywanych w plikach cookies. Poniżej znajdziesz pełny zakres informacji na ten temat.
Zgadzam się na przechowywanie na urządzeniu, z którego korzystam tzw. plików cookies oraz na przetwarzanie moich danych osobowych pozostawianych w czasie korzystania przeze mnie ze strony internetowej Laboratoria.net w celach marketingowych, w tym na profilowanie i w celach analitycznych.
Administratorami Twoich danych będziemy my: Portal Laboratoria.net z siedzibą w Krakowie (Grupa INTS ul. Czerwone Maki 55/25 30-392 Kraków).
Chodzi o dane osobowe, które są zbierane w ramach korzystania przez Ciebie z naszych usług w tym zapisywanych w plikach cookies.
Przetwarzamy te dane w celach opisanych w polityce prywatności, między innymi aby:
dopasować treści stron i ich tematykę, w tym tematykę ukazujących się tam materiałów do Twoich zainteresowań,
dokonywać pomiarów, które pozwalają nam udoskonalać nasze usługi i sprawić, że będą maksymalnie odpowiadać Twoim potrzebom,
pokazywać Ci reklamy dopasowane do Twoich potrzeb i zainteresowań.
Zgodnie z obowiązującym prawem Twoje dane możemy przekazywać podmiotom przetwarzającym je na nasze zlecenie, np. agencjom marketingowym, podwykonawcom naszych usług oraz podmiotom uprawnionym do uzyskania danych na podstawie obowiązującego prawa np. sądom lub organom ścigania – oczywiście tylko gdy wystąpią z żądaniem w oparciu o stosowną podstawę prawną.
Masz między innymi prawo do żądania dostępu do danych, sprostowania, usunięcia lub ograniczenia ich przetwarzania. Możesz także wycofać zgodę na przetwarzanie danych osobowych, zgłosić sprzeciw oraz skorzystać z innych praw.
Każde przetwarzanie Twoich danych musi być oparte na właściwej, zgodnej z obowiązującymi przepisami, podstawie prawnej. Podstawą prawną przetwarzania Twoich danych w celu świadczenia usług, w tym dopasowywania ich do Twoich zainteresowań, analizowania ich i udoskonalania oraz zapewniania ich bezpieczeństwa jest niezbędność do wykonania umów o ich świadczenie (tymi umowami są zazwyczaj regulaminy lub podobne dokumenty dostępne w usługach, z których korzystasz). Taką podstawą prawną dla pomiarów statystycznych i marketingu własnego administratorów jest tzw. uzasadniony interes administratora. Przetwarzanie Twoich danych w celach marketingowych podmiotów trzecich będzie odbywać się na podstawie Twojej dobrowolnej zgody.
Dlatego też proszę zaznacz przycisk "zgadzam się" jeżeli zgadzasz się na przetwarzanie Twoich danych osobowych zbieranych w ramach korzystania przez ze mnie z portalu *Laboratoria.net, udostępnianych zarówno w wersji "desktop", jak i "mobile", w tym także zbieranych w tzw. plikach cookies. Wyrażenie zgody jest dobrowolne i możesz ją w dowolnym momencie wycofać.
Więcej w naszej POLITYCE PRYWATNOŚCI
Recenzje