Akceptuję
W ramach naszej witryny stosujemy pliki cookies w celu świadczenia państwu usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczone w Państwa urządzeniu końcowym. Możecie Państwo dokonać w każdym czasie zmiany ustawień dotyczących cookies. Więcej szczegółów w naszej Polityce Prywatności

Zamknij X
Labro glowna
Strona główna Artykuły
Dodatkowy u góry

Metody wykorzystywane do oznaczania żelaza w różnych próbkach biologicznych

 

Wykonanie oznaczenia:

1) Do 2 ml badanej surowicy dodać 5 ml roztworu o-fenantroliny w buforze octanowym o pH=4,4 (tj.:9,594 g CH3COOH∙3H2O, 1,68 ml lodowatego CH3COOH, 0,2 g chlorowodorku  hydroksylaminy oraz 0,15 g o-fenantroliny należy dokładnie rozpuścić, po czym uzupełnić wodą do objętości 200 ml), wymieszać i ogrzewać we wrzącej łaźni wodnej przez 5 minut. Próbkę wyjąć, ochłodzić w strumieniu zimnej wody, a następnie dodać 1 ml CCl4. Całość wytrząsać prze ok. 1 minutę do momentu rozbicia skrzepu skoagulowanego białka. Próbkę odwirować (3000 obr./min, 20 minut). Zlać klarowny supernatant, w którym oznaczyć wartość absorbancji wobec próby kontrolnej (przy długości fali równej λ= 512 nm). Oznaczenie wykonywać w kuwetach o możliwie największej grubości warstwy [1].

2) Oznaczenie dla próby kontrolnej i wzorcowej wykonywane jest w identyczny sposób jak opisany wyżej, przy czym zamiast 2 ml surowicy do próbek dodaje się 2 ml wody lub roztworów wzorcowych (o określonych stężeniach). Na podstawie otrzymanych wyników wykreśla się krzywą kalibracyjną (bez dodawania CCl4 i bez wirowania).

Stężenie żelaza w próbkach odczytać z wykreślonej krzywej kalibracyjnej lub obliczyć ze wzoru:

 

µg/100 ml= (A(roztworu badanego) / A(wzorca)) x c(wzorca) [µg/100 ml] [1]

 

Hepcydyna

Główną rolę w regulacji me­tabolizmu żelaza pełni hepcydyna.  Jest to peptyd o właściwościach bakteriobójczych i przeciwgrzybiczych, którego nazwa odzwierciedla główne miejsce jego syntezy i właściwości bakteriobójcze [7]. U ludzi hepcydyna kodowana jest przez gen HAMP (o dłu­gości 2,5 kb, znajdujący się na ramieniu długim chromosomu 19). Ekspresja mRNA hepcydyny odbywa się przede wszystkim w hepatocytach, aczkolwiek peptyd ten w mniejszym stopniu moż­na również wyizolować z makrofagów, adipocytów, komórek nerki lub śledziony oraz wielu innych tkanek i komórek. W osoczu krwi hepcydyna krąży w postaci niezmienionej lub w połączeniu z α-2-makroglobuliną, ulegając prawie całkowitej filtracji w nerkach. Prawie 95% hep­cydyny z osocza jest filtrowane przez kłębuszki nerkowe, a następnie ulega wchłanianiu zwrotnemu i rozpadowi w kanalikach bliższych nerek. Jedynie 5% z osoczowej puli tego peptydu zostaje wydalona przez nerki w postaci niezmienio­nej. Hepcydynę uznawana jest za główną cząsteczkę sygnałową, biorącą udział w re­gulacji  metabolizmu żelaza [7].

 

Przemiany żelaza

Przemiany żelaza w organizmie zachodzą w układzie zamkniętym, a pierwiastek ten znajduje się w ciągłym obiegu. Do hemoglobiny wbudowywane jest ok. 25 mg żelaza na dobę. W puli żelazowej, zdecydowana większość (ok. 80%) żelaza pochodzi z hemoglobiny niszczonych krwinek czerwonych (erytrocytów), a 20% z pożywienia i puli zmagazynowanej w ustroju. Do wchłaniania żelaza dochodzi w dwunastnicy oraz bliższym odcinku jelita cienkiego [8]. Zawarty w pokarmach jon żelazowy Fe³+ przechodzi redukcję  do jonu żelazawego Fe²+. By do niej doszło spełnione muszą być odpowiednie warunki, tj. kwaśne pH żołądka oraz obecność reduktazy Fe w dwunastnicy. Do czynników, które ułatwiają wchłanianie Fe należą: witamina C, dieta bogata w białka i aminokwasy oraz niskie pH soku żołądkowego. Wśród czynników hamujących jego wchłanianie wymienia się stosowanie leków zobojętniających kwas żołądkowy (H2-blokery, inhibitory pompy protonowej), tetracyklin, chinolonów, a także picie kawy i herbaty [8].


Tagi: żelazo, surowica, metoda rodankowa, spektrofotometria, roztwór wzorcowy, rodanek potasu, metodą 1, 10-fenantrolinowa, metoda Ramsaya, α, α’-dipirydyl, o-fenantrolina, peptyd hepcydyna, TSH, niedoczynność żelaza
Drukuj PDF
wstecz Podziel się ze znajomymi

Recenzje



Informacje dnia: Polscy badacze opracowali fotoniczny sztuczny neuron To mit, że nowe media zawsze niszczą mózg dziecka Nagrano, jak wirus próbuje atakować komórki Sztuczne światło sprzyja cukrzycy Popularny suplement diety może zwiększać ryzyko raka Przeciwko Covid-19 trzeba dziś szukać nowych form szczepionki Polscy badacze opracowali fotoniczny sztuczny neuron To mit, że nowe media zawsze niszczą mózg dziecka Nagrano, jak wirus próbuje atakować komórki Sztuczne światło sprzyja cukrzycy Popularny suplement diety może zwiększać ryzyko raka Przeciwko Covid-19 trzeba dziś szukać nowych form szczepionki Polscy badacze opracowali fotoniczny sztuczny neuron To mit, że nowe media zawsze niszczą mózg dziecka Nagrano, jak wirus próbuje atakować komórki Sztuczne światło sprzyja cukrzycy Popularny suplement diety może zwiększać ryzyko raka Przeciwko Covid-19 trzeba dziś szukać nowych form szczepionki

Partnerzy

GoldenLine Fundacja Kobiety Nauki Job24 Obywatele Nauki NeuroSkoki Portal MaterialyInzynierskie.pl Uni Gdansk MULTITRAIN I MULTITRAIN II Nauki przyrodnicze KOŁO INZYNIERÓW PB ICHF PAN FUNDACJA JWP NEURONAUKA Mlodym Okiem Polski Instytut Rozwoju Biznesu Analityka Nauka w Polsce CITTRU - Centrum Innowacji, Transferu Technologii i Rozwoju Uniwersytetu Akademia PAN Chemia i Biznes Farmacom Świat Chemii Forum Akademickie Biotechnologia     Bioszkolenia Geodezja Instytut Lotnictwa EuroLab

Szanowny Czytelniku!

 
25 maja 2018 roku zacznie obowiązywać Rozporządzenie Parlamentu Europejskiego i Rady (UE) 2016/679 z dnia 27 kwietnia 2016 r (RODO). Potrzebujemy Twojej zgody na przetwarzanie Twoich danych osobowych przechowywanych w plikach cookies. Poniżej znajdziesz pełny zakres informacji na ten temat.
 
Zgadzam się na przechowywanie na urządzeniu, z którego korzystam tzw. plików cookies oraz na przetwarzanie moich danych osobowych pozostawianych w czasie korzystania przeze mnie ze strony internetowej Laboratoria.net w celach marketingowych, w tym na profilowanie i w celach analitycznych.

Kto będzie administratorem Twoich danych?

Administratorami Twoich danych będziemy my: Portal Laboratoria.net z siedzibą w Krakowie (Grupa INTS ul. Czerwone Maki 55/25 30-392 Kraków).

O jakich danych mówimy?

Chodzi o dane osobowe, które są zbierane w ramach korzystania przez Ciebie z naszych usług w tym zapisywanych w plikach cookies.

Dlaczego chcemy przetwarzać Twoje dane?

Przetwarzamy te dane w celach opisanych w polityce prywatności, między innymi aby:

Komu możemy przekazać dane?

Zgodnie z obowiązującym prawem Twoje dane możemy przekazywać podmiotom przetwarzającym je na nasze zlecenie, np. agencjom marketingowym, podwykonawcom naszych usług oraz podmiotom uprawnionym do uzyskania danych na podstawie obowiązującego prawa np. sądom lub organom ścigania – oczywiście tylko gdy wystąpią z żądaniem w oparciu o stosowną podstawę prawną.

Jakie masz prawa w stosunku do Twoich danych?

Masz między innymi prawo do żądania dostępu do danych, sprostowania, usunięcia lub ograniczenia ich przetwarzania. Możesz także wycofać zgodę na przetwarzanie danych osobowych, zgłosić sprzeciw oraz skorzystać z innych praw.

Jakie są podstawy prawne przetwarzania Twoich danych?

Każde przetwarzanie Twoich danych musi być oparte na właściwej, zgodnej z obowiązującymi przepisami, podstawie prawnej. Podstawą prawną przetwarzania Twoich danych w celu świadczenia usług, w tym dopasowywania ich do Twoich zainteresowań, analizowania ich i udoskonalania oraz zapewniania ich bezpieczeństwa jest niezbędność do wykonania umów o ich świadczenie (tymi umowami są zazwyczaj regulaminy lub podobne dokumenty dostępne w usługach, z których korzystasz). Taką podstawą prawną dla pomiarów statystycznych i marketingu własnego administratorów jest tzw. uzasadniony interes administratora. Przetwarzanie Twoich danych w celach marketingowych podmiotów trzecich będzie odbywać się na podstawie Twojej dobrowolnej zgody.

Dlatego też proszę zaznacz przycisk "zgadzam się" jeżeli zgadzasz się na przetwarzanie Twoich danych osobowych zbieranych w ramach korzystania przez ze mnie z portalu *Laboratoria.net, udostępnianych zarówno w wersji "desktop", jak i "mobile", w tym także zbieranych w tzw. plikach cookies. Wyrażenie zgody jest dobrowolne i możesz ją w dowolnym momencie wycofać.
 
Więcej w naszej POLITYCE PRYWATNOŚCI
 

Newsletter

Zawsze aktualne informacje