Akceptuję
W ramach naszej witryny stosujemy pliki cookies w celu świadczenia państwu usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczone w Państwa urządzeniu końcowym. Możecie Państwo dokonać w każdym czasie zmiany ustawień dotyczących cookies. Więcej szczegółów w naszej Polityce Prywatności

Zamknij X
Labro glowna
Strona główna Artykuły
Dodatkowy u góry
Labro na dole

Izolacja oraz analiza wybranych parametrów płytek krwi cz. 2

 

Adhezja płytek krwi

 

Uznawana jest za pierwszy etap hemostazy płytkowej. Hemostaza to zdolność krwinek płytkowych do przylegania do obcych powierzchni (w przypadku, gdy dojdzie do uszkodzenia naczynia krwionośnego płytki ulegają adhezji głównie do włókien kolagenu, fibronektyny, lamininy czy witronektyny). Ponadto na proces adhezji istotny wpływ mają również warunki reologiczne krwi.

Aktywacja płytek krwi jest następstwem adhezji do macierzy pozakomórkowej oraz działania agonistów, a jej wynikiem jest uwolnienie substancji zawartych w ziarnistościach oraz dalsze pobudzenie krwinek płytkowych. Kluczową rolę w tym procesie odgrywają szlaki metaboliczne, które to inicjowane są przez hydrolizę fosfolipidów błonowych. Oprócz płytek, w procesie krzepnięcia krwi bardzo duże znaczenie mają mikrocząsteczki, powstające w wyniku odszczepiania się od aktywowanych krwinek płytkowych. Kolejnym etapem hemostazy płytkowej jest agregacja płytek, podczas której płytki łączą się w większe konglomeraty, a między nimi zachodzą wzajemne interakcji. Głównym warunkiem zajścia agregacji płytek krwi jest utworzenie między nimi mostków fibrynogenowych [4].

 

W przypadku badań agregacji krwinek płytkowych wykorzystywane są metody oparte na pomiarze stopnia zlepiania się płytek krwi po dodaniu do próbki substancji aktywujących. W trakcie oznaczenia oceniana jest liczba zagregowanych płytek krwi lub liczba krwinek płytkowych, które zostają przyłączone do kuleczek opłaszczonych odpowiednimi substancjami aktywującymi po zakończeniu reakcji. Na wyniki badania mają wpływ: małopłytkowość, zaburzenia czynności krwinek płytkowych, a także stosowanie leków przeciwpłytkowych [4].

 

Czas okluzji płytek krwi

 

Podczas analizy czasu okluzji płytek krwi, badaną próbkę krwi poddaje się działaniu substancji aktywujących płytki. Mieszanina krwi wraz z aktywatorem przepuszczana jest następnie przez rurkę o małej średnicy, której otwór pokryty jest kolagenem.

W prawidłowej próbce krwi, aktywowane krwinki płytkowe opłaszczają się na brzegu otworu w wyniku, czego dochodzi do jego zaczopowania. Czas okluzji definiowany jest jako: „czas, w którym dochodzi do zamknięcia światła otworu”. W przypadku, gdy wartość ta przekracza przedział 71–118 sekund (w przypadku stymulacji płytek kolagenem i ADP) lub przedział 85–165 sekund (dla stymulacji kolagenem i epinefryną), świadczy to o nieprawidłowej funkcji płytek krwi. Nieprawidłowe wyniki badania otrzymuje się w przypadku małopłytkowości lub w trakcie przyjmowania przez pacjenta leków przeciwpłytkowych [4].

 

Konduktometryczna i fotooptyczna metoda oznaczania płytek krwi

 

W diagnostyce laboratoryjnej do oznaczania ilości płytek krwi wykorzystywane są standardowe analizatory hematologiczne, w których stosowane są dwie metody: konduktometryczna i fotooptyczna.

W metodzie konduktometrycznej wykorzystuje się pomiar przewodnictwa elektrycznego, który zależy od liczby i wielkości komórek. W metodzie fotooptycznej poza pomiarem przewodnictwa mierzona jest również impedancja (tj. wielkość charakteryzująca zależność między natężeniem prądu i napięciem w obwodach prądu zmiennego), rozproszenie oraz załamanie światła.

W celu bardziej szczegółowej analizy wykorzystywana jest także metoda immunologiczna, która pozwala na precyzyjne określenie liczby płytek krwi, ekspresji receptorów płytkowych, a także zmiany kształtu płytek. Metoda immunologiczna znalazła zastosowanie w badaniach fizjologii, aktywacji i reaktywności płytek, a także do analizy oddziaływania płytek z leukocytami i komórkami śródbłonka.  Zastosowanie cytometrii umożliwia określenie liczby płytek retikulocytarnych w badanych próbkach na podstawie analizy obecności resztkowego mRNA, a zastosowanie substancji wiążących jony wapniowe pozwala na oznaczenie jego stężenia wewnątrz płytki krwi. Co więcej, dzięki tej metodzie możliwe jest oznaczanie frakcji zużytych płytek i agregatów płytkowych. Jednocześnie możliwe jest określenie czy utworzone agregaty płytkowe zbudowane są jedynie z trombocytów czy zawierają też domieszkę leukocytów [7].

 

Utrwalanie płytek krwi- metody przechowywania próbek

W 1960 roku, płytki krwi przechowywano się w temperaturze 4°C, dzięki czemu zmniejszano proliferację bakterii w danej próbce. Jednak badania na tych preparatach wykazały, że zimne warunki były niekorzystne dla przetrwania płytek, a otrzymany produkt miał trwałość zaledwie 24 godzin. W 1970 roku wykazano, że płytki mają większą skuteczność i lepiej zachowują się w próbkach przechowywanych w temperaturze pokojowej (22°C). W połowie 1980 roku, ustalono, że płytki krwi mogą być przechowywane przez okres do 5 dni w temperaturze 22°C [13].

Kriokonserwacja płytek krwi

Płytki krwi można poddać kriokonserwacji w 6% sulfotlenku dimetylu (DMSO) przez okres do 10 lat, (przy przechowywaniu w temperaturze -80 °C). Wadą tej metody jest fakt, że kriokonserwacja jest trudna i o wiele kosztowniejsza, niż wytwarzanie świeżych płytek. Z kolei sam proces mrożenia może wywoływać pewne wady morfologiczne.

Zamrożone płytki są jedyną alternatywą dla świeżych płytek krwi w klinicznym wykorzystaniu, jednakże ich stosowanie jest na ogół ograniczone do przechowywania autologicznych płytek krwi do transfuzji (np. dla pacjentów z ostrą białaczką) [13].


Tagi: trombocyty, płytki krwi, ziarnistości, osocze bogatopłytkowe, PRP, przeciwciała płytkowe, okluzja, utrwalanie, cytometr przepływowy, liofilizacja, frakcjonowanie, megakariocyt, propłytki, proliferacja, trombopoetyna
Drukuj PDF
wstecz Podziel się ze znajomymi

Recenzje



Informacje dnia: Biologia przystosowała człowieka do przeżywania sytuacji stresowych Wiadomo, jak niektóre bakterie rozkładają plastik Sztuczna inteligencja badając oczy, oceni ryzyko chorób serca Szczepionka przeciwko wirusowi HPV Całe “okablowanie” mózgu muszki opisane Dzięki pracy noblistów AI stała się jedną z najważniejszych technologii Biologia przystosowała człowieka do przeżywania sytuacji stresowych Wiadomo, jak niektóre bakterie rozkładają plastik Sztuczna inteligencja badając oczy, oceni ryzyko chorób serca Szczepionka przeciwko wirusowi HPV Całe “okablowanie” mózgu muszki opisane Dzięki pracy noblistów AI stała się jedną z najważniejszych technologii Biologia przystosowała człowieka do przeżywania sytuacji stresowych Wiadomo, jak niektóre bakterie rozkładają plastik Sztuczna inteligencja badając oczy, oceni ryzyko chorób serca Szczepionka przeciwko wirusowi HPV Całe “okablowanie” mózgu muszki opisane Dzięki pracy noblistów AI stała się jedną z najważniejszych technologii

Partnerzy

GoldenLine Fundacja Kobiety Nauki Job24 Obywatele Nauki NeuroSkoki Portal MaterialyInzynierskie.pl Uni Gdansk MULTITRAIN I MULTITRAIN II Nauki przyrodnicze KOŁO INZYNIERÓW PB ICHF PAN FUNDACJA JWP NEURONAUKA Mlodym Okiem Polski Instytut Rozwoju Biznesu Analityka Nauka w Polsce CITTRU - Centrum Innowacji, Transferu Technologii i Rozwoju Uniwersytetu Akademia PAN Chemia i Biznes Farmacom Świat Chemii Forum Akademickie Biotechnologia     Bioszkolenia Geodezja Instytut Lotnictwa EuroLab

Szanowny Czytelniku!

 
25 maja 2018 roku zacznie obowiązywać Rozporządzenie Parlamentu Europejskiego i Rady (UE) 2016/679 z dnia 27 kwietnia 2016 r (RODO). Potrzebujemy Twojej zgody na przetwarzanie Twoich danych osobowych przechowywanych w plikach cookies. Poniżej znajdziesz pełny zakres informacji na ten temat.
 
Zgadzam się na przechowywanie na urządzeniu, z którego korzystam tzw. plików cookies oraz na przetwarzanie moich danych osobowych pozostawianych w czasie korzystania przeze mnie ze strony internetowej Laboratoria.net w celach marketingowych, w tym na profilowanie i w celach analitycznych.

Kto będzie administratorem Twoich danych?

Administratorami Twoich danych będziemy my: Portal Laboratoria.net z siedzibą w Krakowie (Grupa INTS ul. Czerwone Maki 55/25 30-392 Kraków).

O jakich danych mówimy?

Chodzi o dane osobowe, które są zbierane w ramach korzystania przez Ciebie z naszych usług w tym zapisywanych w plikach cookies.

Dlaczego chcemy przetwarzać Twoje dane?

Przetwarzamy te dane w celach opisanych w polityce prywatności, między innymi aby:

Komu możemy przekazać dane?

Zgodnie z obowiązującym prawem Twoje dane możemy przekazywać podmiotom przetwarzającym je na nasze zlecenie, np. agencjom marketingowym, podwykonawcom naszych usług oraz podmiotom uprawnionym do uzyskania danych na podstawie obowiązującego prawa np. sądom lub organom ścigania – oczywiście tylko gdy wystąpią z żądaniem w oparciu o stosowną podstawę prawną.

Jakie masz prawa w stosunku do Twoich danych?

Masz między innymi prawo do żądania dostępu do danych, sprostowania, usunięcia lub ograniczenia ich przetwarzania. Możesz także wycofać zgodę na przetwarzanie danych osobowych, zgłosić sprzeciw oraz skorzystać z innych praw.

Jakie są podstawy prawne przetwarzania Twoich danych?

Każde przetwarzanie Twoich danych musi być oparte na właściwej, zgodnej z obowiązującymi przepisami, podstawie prawnej. Podstawą prawną przetwarzania Twoich danych w celu świadczenia usług, w tym dopasowywania ich do Twoich zainteresowań, analizowania ich i udoskonalania oraz zapewniania ich bezpieczeństwa jest niezbędność do wykonania umów o ich świadczenie (tymi umowami są zazwyczaj regulaminy lub podobne dokumenty dostępne w usługach, z których korzystasz). Taką podstawą prawną dla pomiarów statystycznych i marketingu własnego administratorów jest tzw. uzasadniony interes administratora. Przetwarzanie Twoich danych w celach marketingowych podmiotów trzecich będzie odbywać się na podstawie Twojej dobrowolnej zgody.

Dlatego też proszę zaznacz przycisk "zgadzam się" jeżeli zgadzasz się na przetwarzanie Twoich danych osobowych zbieranych w ramach korzystania przez ze mnie z portalu *Laboratoria.net, udostępnianych zarówno w wersji "desktop", jak i "mobile", w tym także zbieranych w tzw. plikach cookies. Wyrażenie zgody jest dobrowolne i możesz ją w dowolnym momencie wycofać.
 
Więcej w naszej POLITYCE PRYWATNOŚCI
 

Newsletter

Zawsze aktualne informacje