Akceptuję
W ramach naszej witryny stosujemy pliki cookies w celu świadczenia państwu usług na najwyższym poziomie, w tym w sposób dostosowany do indywidualnych potrzeb. Korzystanie z witryny bez zmiany ustawień dotyczących cookies oznacza, że będą one zamieszczone w Państwa urządzeniu końcowym. Możecie Państwo dokonać w każdym czasie zmiany ustawień dotyczących cookies. Więcej szczegółów w naszej Polityce Prywatności

Zamknij X
Reklama4
Strona główna Artykuły
Dodatkowy u góry

Dodatkowy na dole

Techniki wykorzystywane do barwienia komórek bakteryjnych


Barwienie proste drobnoustrojów

W barwieniu prostym wykorzystywany jest tylko jeden barwnik (np. błękit metylenowy lub fuksyna), którym traktuje się preparat przez ok. 1-2 minuty. Wśród metod barwienia znana jest metoda barwnikiem Giemsy, która pozwala na wybarwienie drobnoustrojów na różne kolory. I tak riketsje barwią się na czerwono, a krętki na fioletowo lub różowo. Barwnik Giemsy znalazł również zastosowanie w cytologii do barwienia do barwienia nukleoidu lub jąderka [2].

Barwienie złożone

W metodzie tej wykorzystywane jest kilka barwników według ściśle określonej kolejności (lub barwników występujących w mieszaninie). Przykładem barwienia złożonego jest barwienie metodą Grama, metodą Neissera i metodą Ziehl-Neelsena. Wśród znanych technik barwienia pojawia się również tzw. barwienie przeżyciowe, polegające na działaniu na nieutrwalony preparat żywych drobnoustrojów barwnikiem przygotowanym w dużym rozcieńczeniu, nie niszcząc tym samym komórek. Wybarwieniu ulegają komórki z uszkodzoną błoną komórkową, dzięki czemu zastosowany barwnik może swobodnie dostać się do jej wnętrza [2].

Barwienie metodą Grama

Metoda została wynaleziona w 1884 roku przez Christiana Grama. Oryginalny opis tej techniki barwienia pojawił się w tym samym roku w publikacji zatytuowanej: "The differential staining of Schizomycetes in tissue sections and in dried preparations" w Fortschitte der Medicin, Vol. 2. [6].

Gram dokonał swojego odkrycia podczas prób różnicowania komórek bakteryjnych z zakażonych tkanek. Pomimo, iż to właśnie Ch. Gram zaobserwował to, co obecnie nazywane jest „reakcją Grama”,nie dostrzegł taksonomicznej wartości tej techniki [3], [5], [6].

 

Metoda barwienia Grama wykorzystywana jest do różnicowania komórek nieuszkodzonych, morfologicznie podobnych bakterii na dwie grupy. Możliwe jest na podstawie oceny  koloru komórki po procesie jej  wybarwienia. Metoda pozwala również na  wyraźne różnicowanie komórek pod względem kształtu, rozmiaru oraz szczegółów strukturalnych. W oryginalnej procedurze barwienia  wykorzystywany jest nieorganiczny jod, który niestety szybko się utlenia i traci swoją skuteczność jako substancja trawiąca. Wraz z wdrożonymi modyfikacjami metody Grama, wprowadzono inny odczynnik tj. L-poliwinylopyrolidono-jod, który różni się od oryginalnego zestawu Grama tym, że jest bardziej stabilnym związkiem organicznym jodu  [3], [5], [6].

 

Podstawy teoretyczne barwienia  metodą Grama

1) Barwienie utrwalonego rozmazu za pomocą fioletu krystalicznego, zastosowanie jodu jako substancji trawiącej [3].

2) Odbarwienie pierwszego barwnika za pomocą alkoholu lub acetonu, a następnie zastosowanie barwnika kontrastowego (safraniny lub zasadowej fuksyny).

3) Kompleks fiolet krystaliczny-jod tworzy się w protoplaście (część komórki bez ściany komórkowej) wszystkich organizmów barwionych za pomocą metody Grama. Organizmy, które są zdolne zachować kompleks barwiący po odbarwieniu klasyfikowane są jako gram-dodatnie, z kolei te, które można odbarwić i zabarwić kontrastowo, zaliczane są do organizmów gram-ujemnych [3]. Kompleks fiolet krystaliczny-jod jest nierozpuszczalny w wodzie i słabo rozpuszczalny w alkoholu oraz acetonie [9].

4) Po pęknięciu (lub usunięciu) ściany komórkowej protoplast komórek gram-dodatnich i gram-ujemnych można odbarwić. Powoduje to  utratę cechy gram-dodatniej. Nienaruszona ściana komórkowa działa jak bariera chroniąca przed odbarwieniem pierwszego barwnika [3].

5) Ściana komórkowa jest przepuszczalna w sposób nieselektywny. Podczas procedury barwienia metodą Grama ściana komórkowa komórek gram-dodatnich ulega odwodnieniu przez alkohol zawarty w odbarwiaczu i traci przepuszczalność, zatrzymując pierwotny barwnik. Ściana komórkowa komórek gram-ujemnych charakteryzuje się większą zawartością lipidów, przez co też staje się bardziej przepuszczalna podczas traktowania komórek alkoholem, co z kolei powoduje utratę pierwszego barwnika [3].

 


Tagi: barwniki, metody barwienia, barwienie metodą Grama, preparat, odbarwianie, analiza mikroskopowa, bakterie gram-zmienne, fuksyna karbolowa, jodek heksydyny, barwienie kwasooporne, metoda Ziehl-Neelsena, pożywka Lowenstein-Jensen, Mycobacterium tuberculosis
Drukuj PDF
wstecz Podziel się ze znajomymi

Recenzje



lewybanner1
Informacje dnia: Fizyczny Nobel 2019 za poznanie Wszechświata i egzoplanet Badania pokazują, dlaczego płodność kobiet zmienia się z wiekiem Więcej energii to więcej efektów – w zderzeniach protonów Niektóre częste choroby i krótki sen to śmiertelne połączenie Nobel z fizjologii i medycyny Nanocząstki w zwalczaniu raka Fizyczny Nobel 2019 za poznanie Wszechświata i egzoplanet Badania pokazują, dlaczego płodność kobiet zmienia się z wiekiem Więcej energii to więcej efektów – w zderzeniach protonów Niektóre częste choroby i krótki sen to śmiertelne połączenie Nobel z fizjologii i medycyny Nanocząstki w zwalczaniu raka Fizyczny Nobel 2019 za poznanie Wszechświata i egzoplanet Badania pokazują, dlaczego płodność kobiet zmienia się z wiekiem Więcej energii to więcej efektów – w zderzeniach protonów Niektóre częste choroby i krótki sen to śmiertelne połączenie Nobel z fizjologii i medycyny Nanocząstki w zwalczaniu raka

Partnerzy

GoldenLine Fundacja Kobiety Nauki Job24 Obywatele Nauki NeuroSkoki Portal MaterialyInzynierskie.pl Uni Gdansk MULTITRAIN I MULTITRAIN II Nauki przyrodnicze KOŁO INZYNIERÓW PB ICHF PAN FUNDACJA JWP NEURONAUKA Mlodym Okiem Polski Instytut Rozwoju Biznesu Analityka Nauka w Polsce CITTRU - Centrum Innowacji, Transferu Technologii i Rozwoju Uniwersytetu Akademia PAN Chemia i Biznes Farmacom Świat Chemii Forum Akademickie Biotechnologia     Geodezja Instytut Lotnictwa EuroLab

Szanowny Czytelniku!

 
25 maja 2018 roku zacznie obowiązywać Rozporządzenie Parlamentu Europejskiego i Rady (UE) 2016/679 z dnia 27 kwietnia 2016 r (RODO). Potrzebujemy Twojej zgody na przetwarzanie Twoich danych osobowych przechowywanych w plikach cookies. Poniżej znajdziesz pełny zakres informacji na ten temat.
 
Zgadzam się na przechowywanie na urządzeniu, z którego korzystam tzw. plików cookies oraz na przetwarzanie moich danych osobowych pozostawianych w czasie korzystania przeze mnie ze strony internetowej Laboratoria.net w celach marketingowych, w tym na profilowanie i w celach analitycznych.

Kto będzie administratorem Twoich danych?

Administratorami Twoich danych będziemy my: Portal Laboratoria.net z siedzibą w Krakowie (Grupa INTS ul. Czerwone Maki 55/25 30-392 Kraków).

O jakich danych mówimy?

Chodzi o dane osobowe, które są zbierane w ramach korzystania przez Ciebie z naszych usług w tym zapisywanych w plikach cookies.

Dlaczego chcemy przetwarzać Twoje dane?

Przetwarzamy te dane w celach opisanych w polityce prywatności, między innymi aby:

Komu możemy przekazać dane?

Zgodnie z obowiązującym prawem Twoje dane możemy przekazywać podmiotom przetwarzającym je na nasze zlecenie, np. agencjom marketingowym, podwykonawcom naszych usług oraz podmiotom uprawnionym do uzyskania danych na podstawie obowiązującego prawa np. sądom lub organom ścigania – oczywiście tylko gdy wystąpią z żądaniem w oparciu o stosowną podstawę prawną.

Jakie masz prawa w stosunku do Twoich danych?

Masz między innymi prawo do żądania dostępu do danych, sprostowania, usunięcia lub ograniczenia ich przetwarzania. Możesz także wycofać zgodę na przetwarzanie danych osobowych, zgłosić sprzeciw oraz skorzystać z innych praw.

Jakie są podstawy prawne przetwarzania Twoich danych?

Każde przetwarzanie Twoich danych musi być oparte na właściwej, zgodnej z obowiązującymi przepisami, podstawie prawnej. Podstawą prawną przetwarzania Twoich danych w celu świadczenia usług, w tym dopasowywania ich do Twoich zainteresowań, analizowania ich i udoskonalania oraz zapewniania ich bezpieczeństwa jest niezbędność do wykonania umów o ich świadczenie (tymi umowami są zazwyczaj regulaminy lub podobne dokumenty dostępne w usługach, z których korzystasz). Taką podstawą prawną dla pomiarów statystycznych i marketingu własnego administratorów jest tzw. uzasadniony interes administratora. Przetwarzanie Twoich danych w celach marketingowych podmiotów trzecich będzie odbywać się na podstawie Twojej dobrowolnej zgody.

Dlatego też proszę zaznacz przycisk "zgadzam się" jeżeli zgadzasz się na przetwarzanie Twoich danych osobowych zbieranych w ramach korzystania przez ze mnie z portalu *Laboratoria.net, udostępnianych zarówno w wersji "desktop", jak i "mobile", w tym także zbieranych w tzw. plikach cookies. Wyrażenie zgody jest dobrowolne i możesz ją w dowolnym momencie wycofać.
 
Więcej w naszej POLITYCE PRYWATNOŚCI
 

Newsletter

Zawsze aktualne informacje