|
Zamknij X
|
Niewątpliwą zaletą przeciwciał poliklonalnych jest ich relatywnie łatwe otrzymywanie, a dzięki zdolności rozpoznawania różnych determinant antygenu powoduje, że przeciwciała poliklonalne cechują się wysoką zachłannością (tzw. awidnością). Wynika to z faktu znacznie większej siły oddziaływania tych przeciwciał z wieloma różnymi epitopami antygenu, co z kolei zwiększa prawdopodobieństwo przyłączenia kolejnego przeciwciała przez sąsiedni epitop [17],[18]. Dzięki przeciwciałom poliklonalnym łatwo i z wysoką czułością można potwierdzić obecność lub brak danego antygenu, a co więcej można również oznaczyć jego stężenie. W odróżnieniu od przeciwciał monoklonalnych, przeciwciała poliklonalne tworzą kompleksy z antygenem, których trwałość w mniejszym stopniu zależy od właściwości roztworu (np. od jego pH) [17].
Zdjęcie: Otrzymywanie przeciwciał poliklonalnych, http://neobiolab.com/research/monoclonal-versus-polyclonal-antibodies
Przeciwciała poliklonalne mają również kilka wad, które znacząco ograniczają ich szersze zastosowanie w diagnostyce, w czułych technikach, takich jak np. cytometria przepływowa. Cząsteczki te nie sprawdzają się np. w wykrywaniu subtelnych różnic w budowie antygenów. W przypadku, gdy dwa antygeny różnią się tylko jednym epitopem, przeciwciała poliklonalne w reakcji krzyżowej (wiązanie białek, które mają identyczny lub zbliżony strukturalnie epitop) rozpoznają obydwa antygeny, co więcej próba wykrycia w mieszaninie antygenów konkretnego antygenu charakteryzującego się wieloma epitopami będzie nieść ze sobą wysokie ryzyko zajścia tzw. reakcji krzyżowych. Konsekwencją tego będzie uzyskanie fałszywie pozytywnych wyników [17],[18].
Metoda otrzymywania przeciwciał monoklonalnych
1) Immunizacja myszy i wybór myszy dawców do wytworzenia komórek hybrydomy: myszy immunizuje się antygenem, który jest przygotowany do iniekcji. Na ogół myszy immunizowane są co 2-3 tygodnie [6].
2) Screening myszy do produkcji przeciwciał: po kilku tygodniach od immunizacji, we krwi myszy sprawdzany jest poziom przeciwciał. Miano przeciwciał w surowicy określane jest kilkoma różnymi technikami, takimi jak ELISA. Gdy miano przeciwciał jest duże, myszy uśmierca się i pobiera się ich śledziony, z których izoluje się pobudzone antygenem limfocyty B.
3) Fuzja komórek szpiczaka z komórkami śledziony: komórki śledziony z immunizowanych myszy poddaje się fuzji z wcześniej przygotowanymi komórkami szpiczaka. Fuzję uzyskuje się za pomocą techniki zwanej hybrydyzacją komórek somatycznych. W metodzie tej równocześnie odwirowywane są świeżo zebrane komórki śledziony i komórki szpiczaka w glikolu polietylenowym, który powoduje zlepianie (fuzję) ich błon komórkowych. Oprócz glikolu polietylenowego bardzo często wykorzystywana jest również izoleucyna. Nie wszystkie komórki ulęgają fuzji: fuzja może też dotyczyć dwóch takich samych komórek (dwie komórki szpiczaka lub dwa limfocyty) [6],[7].
25 maja 2018 roku zacznie obowiązywać Rozporządzenie Parlamentu Europejskiego i Rady (UE) 2016/679 z dnia 27 kwietnia 2016 r (RODO). Potrzebujemy Twojej zgody na przetwarzanie Twoich danych osobowych przechowywanych w plikach cookies. Poniżej znajdziesz pełny zakres informacji na ten temat.
Zgadzam się na przechowywanie na urządzeniu, z którego korzystam tzw. plików cookies oraz na przetwarzanie moich danych osobowych pozostawianych w czasie korzystania przeze mnie ze strony internetowej Laboratoria.net w celach marketingowych, w tym na profilowanie i w celach analitycznych.
Administratorami Twoich danych będziemy my: Portal Laboratoria.net z siedzibą w Krakowie (Grupa INTS ul. Czerwone Maki 55/25 30-392 Kraków).
Chodzi o dane osobowe, które są zbierane w ramach korzystania przez Ciebie z naszych usług w tym zapisywanych w plikach cookies.
Przetwarzamy te dane w celach opisanych w polityce prywatności, między innymi aby:
dopasować treści stron i ich tematykę, w tym tematykę ukazujących się tam materiałów do Twoich zainteresowań,
dokonywać pomiarów, które pozwalają nam udoskonalać nasze usługi i sprawić, że będą maksymalnie odpowiadać Twoim potrzebom,
pokazywać Ci reklamy dopasowane do Twoich potrzeb i zainteresowań.
Zgodnie z obowiązującym prawem Twoje dane możemy przekazywać podmiotom przetwarzającym je na nasze zlecenie, np. agencjom marketingowym, podwykonawcom naszych usług oraz podmiotom uprawnionym do uzyskania danych na podstawie obowiązującego prawa np. sądom lub organom ścigania – oczywiście tylko gdy wystąpią z żądaniem w oparciu o stosowną podstawę prawną.
Masz między innymi prawo do żądania dostępu do danych, sprostowania, usunięcia lub ograniczenia ich przetwarzania. Możesz także wycofać zgodę na przetwarzanie danych osobowych, zgłosić sprzeciw oraz skorzystać z innych praw.
Każde przetwarzanie Twoich danych musi być oparte na właściwej, zgodnej z obowiązującymi przepisami, podstawie prawnej. Podstawą prawną przetwarzania Twoich danych w celu świadczenia usług, w tym dopasowywania ich do Twoich zainteresowań, analizowania ich i udoskonalania oraz zapewniania ich bezpieczeństwa jest niezbędność do wykonania umów o ich świadczenie (tymi umowami są zazwyczaj regulaminy lub podobne dokumenty dostępne w usługach, z których korzystasz). Taką podstawą prawną dla pomiarów statystycznych i marketingu własnego administratorów jest tzw. uzasadniony interes administratora. Przetwarzanie Twoich danych w celach marketingowych podmiotów trzecich będzie odbywać się na podstawie Twojej dobrowolnej zgody.
Dlatego też proszę zaznacz przycisk "zgadzam się" jeżeli zgadzasz się na przetwarzanie Twoich danych osobowych zbieranych w ramach korzystania przez ze mnie z portalu *Laboratoria.net, udostępnianych zarówno w wersji "desktop", jak i "mobile", w tym także zbieranych w tzw. plikach cookies. Wyrażenie zgody jest dobrowolne i możesz ją w dowolnym momencie wycofać.
Więcej w naszej POLITYCE PRYWATNOŚCI
Recenzje