|
Zamknij X
|
Zahamowanie agregacji płytek krwi
Agregacja płytek zostaje zahamowana pod wpływem działania specyficznych inhibitorów, wśród których wymienia się związki chelatujące jony wapnia (Ca2+), inhibitorymetaboliczne (KCN) czy heparynę, która powoduje znoszenie działania trombiny. Do inhibitorów aktywacji płytek należą również leki przeciwpłytkowe (o różnym mechanizmie działania), w tym m.in. leki działające poprzez metabolizm kwasu arachidonowego, związki blokujące receptor fibrynogenu, inhibitory interakcji czynnika von Willebranda czy też leki kardiolityczne [2].
Wykonanie oznaczenia:
a) Wpływ inhibitorów na agregację płytek wywołaną trombiną: do przygotowanych trzech probówek należy wprowadzić po 1 ml zawiesiny płytek (płytki krwi otrzymane metodą wirowania osocza bogatopłytkowego i zawieszone w buforze Tyroda), a następnie:
- do pierwszej probówki dodać 1 M roztwór kwasu acetylosalicylowego (tj. 0,9 g kwasu acetylosalicylowego rozpuścić w wodzie, dodając 0,9 ml 10 M roztworu NaOH. Po rozpuszczeniu próbki należy doprowadzić objętość do 4,7 ml i pH= 7).
- do drugiej probówki dodać 0,5 ml 0,01 M roztworu EDTA
- do trzeciej probówki stanowiącej próbę kontrolną należy dodać 0,5 ml buforu Tyroda (tj. 10 mM HEPES, 140 mM NaCl, 3 mM KCl, 0,5 mM MgCl2, 5 mM NaHCO3, 10 mM glukoza, pH= 7.4).
Próbki inkubować w 37⁰C przez 5 minut, a następnie do wszystkich dodać 50 j. NIH trombiny (tj. 400 j. NIH/ml). Obserwować, w której probówce nie zachodzi agregacja płytek [2].
b) Wpływ inhibitorów na agregację płytek wywołaną ADP: przygotować 3 probówki, do których kolejno dodać po 1 ml zawiesiny płytek, a następnie do pierwszej dodać 0,2 ml roztworu apyrazy (1 mg/ml), do drugiej wporwadzić 0,2 ml 0,01 M roztworu EDTA, a do trzeciej 0,2 ml buforu Tyroda. Próbka nr 3 stanowi kontrolę.
Wszystkie próbki inkubować w 37⁰C przez 5 minut, po czym dodać do każdej po 0,1 ml 1 mM roztworu ADP, a po wymieszaniu zawartości probówek obserwować, w której zachodzi agregacja.
-
Wybrane metody wykorzystywane do oceny funkcji płytek krwi
Agregometria
To metoda oparta na transmisji światła widzialnego (ang. light transmission aggregometry, LTA), któraz została opracowana w 1960 r. i jest wykorzystywana do diagnozowania zarówno nabytych, jak i wrodzonych defektów płytek. Metoda po dziś dzień pozostaje tzw. złotym standardem badania funkcji płytek. Zasada działania testu opiera się na pomiarze stopnia agregacji płytkowo-płytkowej przy wykorzystaniu turbidymetrii w osoczu bogatopłytkowym lub impedancji elektrycznej w krwi pełnej. Główną zaletą testu jest możliwość pomiaru w warunkach ex vivo najważniejszej funkcji płytek [16].
Agregacja płytek może być oceniana ilościowo, poprzez pomiar transmisji promienia świetlnego przechodzącego przez ich zawiesinę. Zjawisko to jest proporcjonalne do gęstości zaktywowanych płytek w agregometrze. W zastosowaniu klinicznym agregacja płytek badana jest z użyciem bogatego w płytki osocza z dodatkiem cytrynianu(cPRP). Krew do badań gromadzona jest w probówkach zawierających cytrynian sodu, a następnie odwirowywana przez 15 min w temperaturze pokojowej [14].
25 maja 2018 roku zacznie obowiązywać Rozporządzenie Parlamentu Europejskiego i Rady (UE) 2016/679 z dnia 27 kwietnia 2016 r (RODO). Potrzebujemy Twojej zgody na przetwarzanie Twoich danych osobowych przechowywanych w plikach cookies. Poniżej znajdziesz pełny zakres informacji na ten temat.
Zgadzam się na przechowywanie na urządzeniu, z którego korzystam tzw. plików cookies oraz na przetwarzanie moich danych osobowych pozostawianych w czasie korzystania przeze mnie ze strony internetowej Laboratoria.net w celach marketingowych, w tym na profilowanie i w celach analitycznych.
Administratorami Twoich danych będziemy my: Portal Laboratoria.net z siedzibą w Krakowie (Grupa INTS ul. Czerwone Maki 55/25 30-392 Kraków).
Chodzi o dane osobowe, które są zbierane w ramach korzystania przez Ciebie z naszych usług w tym zapisywanych w plikach cookies.
Przetwarzamy te dane w celach opisanych w polityce prywatności, między innymi aby:
dopasować treści stron i ich tematykę, w tym tematykę ukazujących się tam materiałów do Twoich zainteresowań,
dokonywać pomiarów, które pozwalają nam udoskonalać nasze usługi i sprawić, że będą maksymalnie odpowiadać Twoim potrzebom,
pokazywać Ci reklamy dopasowane do Twoich potrzeb i zainteresowań.
Zgodnie z obowiązującym prawem Twoje dane możemy przekazywać podmiotom przetwarzającym je na nasze zlecenie, np. agencjom marketingowym, podwykonawcom naszych usług oraz podmiotom uprawnionym do uzyskania danych na podstawie obowiązującego prawa np. sądom lub organom ścigania – oczywiście tylko gdy wystąpią z żądaniem w oparciu o stosowną podstawę prawną.
Masz między innymi prawo do żądania dostępu do danych, sprostowania, usunięcia lub ograniczenia ich przetwarzania. Możesz także wycofać zgodę na przetwarzanie danych osobowych, zgłosić sprzeciw oraz skorzystać z innych praw.
Każde przetwarzanie Twoich danych musi być oparte na właściwej, zgodnej z obowiązującymi przepisami, podstawie prawnej. Podstawą prawną przetwarzania Twoich danych w celu świadczenia usług, w tym dopasowywania ich do Twoich zainteresowań, analizowania ich i udoskonalania oraz zapewniania ich bezpieczeństwa jest niezbędność do wykonania umów o ich świadczenie (tymi umowami są zazwyczaj regulaminy lub podobne dokumenty dostępne w usługach, z których korzystasz). Taką podstawą prawną dla pomiarów statystycznych i marketingu własnego administratorów jest tzw. uzasadniony interes administratora. Przetwarzanie Twoich danych w celach marketingowych podmiotów trzecich będzie odbywać się na podstawie Twojej dobrowolnej zgody.
Dlatego też proszę zaznacz przycisk "zgadzam się" jeżeli zgadzasz się na przetwarzanie Twoich danych osobowych zbieranych w ramach korzystania przez ze mnie z portalu *Laboratoria.net, udostępnianych zarówno w wersji "desktop", jak i "mobile", w tym także zbieranych w tzw. plikach cookies. Wyrażenie zgody jest dobrowolne i możesz ją w dowolnym momencie wycofać.
Więcej w naszej POLITYCE PRYWATNOŚCI
Recenzje